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微生物檢測菌落總數空白長菌了是什么原因

作者:上海恩計儀器 時間:2025-06-17 17:11:49 點擊:900 次

  在微生物檢測中,菌落總數空白長菌意味著在未添加待測樣品的空白對照培養基上出現了菌落生長,這通常是不正常的情況,可能由多種因素導致,以下為你詳細分析:

  1、實驗用品污染

  培養基污染

  原因:培養基在制備、滅菌或儲存過程中可能受到污染。例如,滅菌不徹底,未能有效殺滅其中存在的微生物;儲存條件不當,如溫度過高、濕度過大或儲存時間過長,導致培養基中的成分變質,滋生微生物。

  舉例:若培養基在高壓蒸汽滅菌時,壓力或時間未達到要求,就可能無法完全殺滅其中的芽孢等耐熱微生物,后續在適宜的培養條件下,這些微生物就會生長繁殖形成菌落。

  培養皿、移液管等器皿污染

  原因:這些器皿在清洗、包裝或滅菌過程中出現問題。比如清洗不徹底,殘留有有機物或微生物;包裝不嚴密,在滅菌前或儲存過程中被污染;滅菌后放置時間過長,受到環境中的微生物污染。

  舉例:培養皿在清洗后未完全晾干就進行包裝滅菌,水分殘留可能導致滅菌不徹底,殘留的微生物在培養時生長。

  試劑污染

  原因:實驗中使用的稀釋液、生理鹽水等試劑可能被污染。試劑在配制、儲存或使用過程中,如果受到環境微生物的侵入,就可能成為污染源。

  舉例:稀釋液在配制時,使用的蒸餾水質量不佳,含有微生物,或者配制后的稀釋液儲存容器未進行嚴格滅菌,都可能導致試劑污染。

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    2、操作過程污染

  無菌操作不規范

  原因:實驗人員在接種、稀釋等操作過程中,未嚴格遵守無菌操作規程。例如,未在超凈工作臺中進行操作,或者操作時未正確佩戴手套、口罩,手部消毒不徹底,導致環境中的微生物進入空白樣品。

  舉例:在接種過程中,實驗人員的手部接觸到培養皿邊緣,將手上的微生物帶入培養基,從而在空白培養基上形成菌落。

  交叉污染

  原因:在操作過程中,不同樣品之間或樣品與空白之間發生了交叉污染。比如,使用同一支移液管吸取不同樣品,未及時更換或清洗;或者在操作臺上同時放置多個樣品,導致微生物擴散。

  舉例:在稀釋樣品時,使用同一支移液管先吸取了含菌樣品,未進行清洗和滅菌就直接吸取空白樣品的稀釋液,將含菌樣品中的微生物帶入了空白樣品。

  3、環境因素

  實驗環境不潔凈

  原因:實驗操作環境中的空氣、桌面等存在大量微生物。如果超凈工作臺未正常運行或過濾效果不佳,空氣中的微生物會落入空白培養基;桌面未進行徹底消毒,也可能成為微生物的來源。

  舉例:超凈工作臺的過濾網長時間未更換,導致過濾效果下降,空氣中的灰塵和微生物進入操作區域,污染空白培養基。

微生物限度儀.jpg

  人員活動影響

  原因:實驗人員在操作過程中頻繁走動、說話等,會帶動空氣流動,增加空氣中微生物進入空白樣品的機會。

  舉例:實驗人員在接種過程中大聲說話,唾液飛沫可能攜帶微生物落入空白培養基。

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